磷酸盐缓冲液
磷酸盐缓冲液(PhosphateBuffer***Saline,PBS)是一种生物学实验中常用的缓冲液,它能够帮助维持生物样品的稳定性,使实验结果更加可靠。磷酸盐缓冲液不仅可以用于细胞培养、蛋白质提取、酶反应等生物学实验,还可以用于医学诊断、药物制剂等领域。本文将从磷酸盐缓冲液的组成、制备方法、应用领域和注意事项等方面进行详细介绍。
组成磷酸盐缓冲液的主要成分包括磷酸盐、氯化钠和氢氧化钠,其中磷酸盐的种类较多,常用的有磷酸二氢钾和磷酸二氢二钠。磷酸盐缓冲液的pH值一般为7.4左右,这是因为该pH值最接近生理环境的pH值,能够保证生物样品的稳定性。
制备方法磷酸盐缓冲液的制备方法较为简单,一般分为两步。第一步是制备10倍浓度的磷酸盐缓冲液,将相应量的磷酸盐和氯化钠加入蒸馏水中,加入适量的氢氧化钠调节pH值至7.4左右,最后加入足量的蒸馏水至总体积的10倍。第二步是将10倍浓度的磷酸盐缓冲液稀释至所需浓度,例如PBS的常用浓度为1×,需要将10倍浓度的磷酸盐缓冲液与蒸馏水按1:9的比例混合即可。
应用领域磷酸盐缓冲液在生物学实验中的应用领域非常广泛,以下是一些常见的应用领域:
- 细胞培养:磷酸盐缓冲液可以作为细胞培养的基础培养液,提供必要的营养和稳定的环境。
- 蛋白质提取:磷酸盐缓冲液可以用于蛋白质的提取和纯化,提高蛋白质的稳定性和可溶性。
- 酶反应:磷酸盐缓冲液可以作为酶反应的缓冲液,调节反应体系的pH值。
- 医学诊断:磷酸盐缓冲液可以用于医学诊断,如洗涤细胞、组织等样品。
- 药物制剂:磷酸盐缓冲液可以用于药物制剂,如注射液、口服液等。
在使用磷酸盐缓冲液时需要注意以下几点:
- 磷酸盐缓冲液应在室温下保存,避免冻结和高温。
- 磷酸盐缓冲液应在使用前检查pH值是否符合要求。
- 不同的实验需要选择不同浓度的磷酸盐缓冲液。
- 磷酸盐缓冲液中的离子浓度和组成可能会影响实验结果,需要根据实验要求进行调整。
磷酸盐:磷酸盐是一类含有磷酸根离子(PO43-)的化合物,广泛存在于自然界中,如磷酸二氢钾、磷酸二氢二钠、三聚磷酸盐等。磷酸盐不仅是生物体内重要的无机盐,还广泛应用于农业、医药、化工等领域。
氯化钠:氯化钠是一种常见的无机盐,也就是我们常说的食盐。它广泛存在于自然界中,如海水、盐湖、岩石等。氯化钠不仅是人体必需的无机盐,还被广泛应用于食品、医药、化工等领域。
氢氧化钠:氢氧化钠是一种强碱性化合物,也称为苛性钠,广泛应用于化工、制药、纺织、皮革等领域。氢氧化钠的水溶液具有强腐蚀性,需注意安全使用。
参考文献:《生物化学实验技术》、《生物学实验技术指南》相关问答拓展:
pbs和pbs磷酸盐缓冲液的区别?
pbs是单系数程序。而pbs磷酸盐缓冲液是双系数程序。
ph6.8的磷酸钠缓冲液怎么配制?可以用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠配制.但首先应该确定缓冲溶液的磷酸盐的浓度和溶液的体积.例如欲配制PH=6.84,磷酸盐浓度为0.06mol/的缓冲溶液1升,需要磷酸二氢钠和火碱的质量各是多少?利用缓冲溶液的公式PH=PKa^2-lg[c(H2PO4^-)/c(HPO4^2-)]把PH=6.84
PKa^2=7.2带入上式计算出磷酸二氢钠与磷酸氢二钠的物质的量比(结果大约为2.5/1).那么需要磷酸二氢钠的质量为0.06×120=7.2克.根据反应NaH2PO4+NaOH=Na2HPO4+H2O需要火碱的质量是40×0.06×1/3.5=0.68克即称取无水磷酸二氢钠7.2克,火碱0.68克,加水溶解,搅拌定容到1升即可.
怎样配制PH=6磷酸缓冲溶液?磷酸盐缓冲液(pH6.5)取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml,用水稀释至100ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH6.6)取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g,加水使溶解成400ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH6.8)取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml,用水稀释至1000ml,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.0)取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml,用水稀释至100ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.2)取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml,加新沸过的冷水稀释至200ml,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.3)取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml,调节pH值至7.3,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.4)取磷酸二氢钾1.36g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml,用水稀释至200ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.6)取磷酸二氢钾27.22g,加水使溶解成1000ml,取50ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml,再加水稀释至200ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.8)甲液:取磷酸氢二钠35.9g,加水溶解,并稀释至500ml。
pbs缓冲液各个ph的配方?配制方法
含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:
称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·2H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20,加水。
PBS:PhosphateBuffer***Saline
PBS1L配方pH7.4:
磷酸二氢钾(KH2PO4):0.24g,
磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.44g,
氯化钠(NaCl):8g,
氯化钾(KCl):0.2g,
加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L
保存方法
加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L。高温高压灭菌后置于4摄氏度冰箱保存待用。
PBS缓冲液(pH7.2~7.4):
KH2PO42mM
Na2HPO48mM
NaCl136mM
KCL2.6mM
PBS缓冲液一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用,具体试剂一般也有不同的比例配方,在针对性上就有了更好的效果。
1xPBS缓冲液就是0.01M的磷酸盐缓冲液,可直接使用。2xPBS就是2倍浓度,使用时稀释一倍使用。0.1M的PBS一般不用来配置缓冲液,用于其它用处。
为什么有的时候用磷酸缓冲液有的时候用盐酸?看情况,如果是跟活泼金属反应,答案是可以;如果是用以配置缓冲溶液等等就不行,原因是:磷酸缓冲液可以控制在ph7.4,可以为偏碱性,因为磷酸为三元酸,而盐酸为强酸,即使浓度稀
也偏酸性。
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