菌种保藏的目的，菌种保藏的方法有哪些

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　　1、目的：尽可能保持菌株的原始特征和活力的稳定，确保菌株不死亡、不变异、不被外部污染，保持菌株的优良特征不退化和优良菌株的生存。2、原理：通过减少微生物的新陈代谢，抑制生长繁殖，延长菌株的生命，减少变异。

　　常用的方法是低温、缺氧和干燥。

　　在使用和传代过程中，菌种容易污染、变异、死亡，导致菌种衰退和优良菌种丢失。

　　菌种保存的目的是尽可能保持菌种原有性质和活力的稳定，保证菌种不死亡、不变异、不被外界污染，保持菌株的优良性质不退化和优良菌株的生存。

　　菌种保存的原理是通过减少微生物的新陈代谢来抑制生长繁殖，从而延长菌种的生命，减少变异。

　　常用的方法主要是低温、缺氧和干燥。避光、添加保护剂、缺乏营养也可以提高保存效果。

　　将菌种接种到合适的固体斜面培养基上。菌种完全生长后，用油纸包扎棉塞，然后转移到2-8℃保存在冰箱里。

　　(1)用三角烧瓶装液体石蜡，塞上棉塞，用牛皮纸包扎，0.1MPa，121.3℃灭菌约30分钟，然后转移到40分钟℃蒸发水蒸气的温箱。

　　(2)在斜面培养基中培养菌种，获得强壮的菌体，然后用灭菌吸管将石蜡注入斜面，用量高于斜面顶部1cm为宜。

　　(3)将试管直立，保存在低温或室温下。

　　(1)准备滤纸条(0)。

　　5×1.2cm），安瓿管(0.6×8cm），将1-2张放入每根管子中，然后将棉塞插入0.1MPa，121.3℃灭菌30分钟。

　　(2)在斜培养基中培养菌种，获得强壮的菌体，然后取出1-2ml灭菌脱脂牛**，滴入灭菌培养皿中，然后取环菌苔在牛**中混合均匀，制成浓悬液。

　　(3)用镊子夹出滤纸条，浸泡在菌悬液中，吸饱后放回安瓿管，塞上棉塞。

　　(4)将安瓿管放入装有五氧化二磷的干燥器中，用真空泵泵泵至干燥，然后将棉花塞入管中，用火焰熔封，低温保存。

　　(5)需要使用菌种时，将安瓿管口在火焰上加热，在加热部位滴一滴冷水，使玻璃破裂，然后用镊子敲掉瓶口端的玻璃。打开安瓿管后，取出滤纸，放入液体培养基中，放入温箱中培养。

　　(1)取出河沙，加入10%稀盐酸，加热煮沸30分钟(去除有机质)。

　　(2)将酸水倒出，用自来水将河沙洗至中性，然后干燥，过筛(40目筛)，去除粗颗粒。

　　(3)取不含腐植质的瘦黄土或红土，浸泡洗涤几次，直至中性。

　　(4)干燥、碾碎、过筛(100目筛)，去除粗颗粒。

　　(5)按2：1的比例的比例混合，放入试管中，塞上棉塞，灭菌约30分钟。

　　(6)在斜培养基中培养菌种，获得强壮的菌体，然后将3-5注入斜培养物中ml用无菌水清洗细胞或孢子制成菌悬液。

　　(7)用无菌吸管吸收菌悬液，均匀滴入沙管，每管0.2-0.5ml，然后真空抽出管道中的水。如果是放线菌和霉菌，可以直接将孢子挑入沙管中。

　　(8)用火焰用火焰熔封，然后放置在低温(4-6℃）保存在干燥处，或直接用牛皮纸或塑料纸包裹沙管，并保存在干燥器中。在储存过程中，每六个月检查一次菌种的存活性和纯度。

　　(1)高压蒸汽灭菌80%甘油。

　　(2)在斜培养基上培养菌种，然后用无菌水制成高浓度的菌悬液。

　　（3）使用1ml甘油与菌液混合均匀，使甘油浓度约为10-30%，然后放在零下70%℃冻存在环境中。

　　(4)甘油-生理盐水(体积比8：2)也可与菌体肉汤混合均匀，然后放在零下20℃保存在环境中。

　　(1)在低温下快速冻结细胞，然后在真空条件下干燥。同时，为了保证细胞在冷冻和水升华过程中不受损伤，应使用保护剂制备细胞悬液(细菌在冷冻和脱水过程中起保护作用的溶质)，通过氢键和离子键对水和细胞产生的亲和力稳定细胞成分的形状。

　　(2)干菌种在真空下封装，与空气隔离，实现长期保存。

　　(3)该方法既有保存低温、干燥、除氧的主要因素，除丝状真菌菌丝外，大部分其他微生物都适用。