长期保存纯化后菌种的方法

2024-02-04 投稿人 : 懂农资网围观 : 671 次

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　　长期保存纯化后菌种的方法是合成维护液的保存方法。纯化需要保存的菌种后，用接种环取一定量，放入装有合成菌种维护液和保护剂牛**的菌种管小试管中，接种到高层半固体琼脂中，用真空熔封菌种管盖住橡皮塞-20℃保存，然后放在-4℃冰箱里的温度。

　　合成维护液长期保存菌种，适用于各种微生物菌种的保存。

好文探索：科普知识——菌株的保存使用

　　1、新引进的菌种经形态、染色、培养性状、生化特性等的鉴别确定后作记录，并进行保存。

　　2、长期保存的储存菌株以冷冻干燥保藏为主，特殊要求的菌种可用其它方法进行保存，保存期可长达几年至几十年。

　　3、半储存菌株以含20%甘油的肉汤或液体石腊封存的半固体琼脂为主，在0℃以下保存，保存期为3－6个月。

　　4、应用菌株以琼脂斜面为主，在4℃保存，保存期为1－3个月。

　　5、菌种的传代不可超过6次。视菌种的特性及使用情况，一般储存菌株每5年传记代一次，每1-2年从储存菌株转接至半储存菌株，半储存菌株每3-6个月传代一次，每1-3个月从半储存菌株转接接至应用菌株。

　　6、每次检验用的菌株必须是从应用菌株转接的新鲜菌株。每支应用菌株用两次后必须销毁（121℃，0.1MPa高压灭菌处理15分钟以上）。

　　7、各级保存的菌株应有明确的编号、名称、传代数、日期等到标识。

　　8、菌种的收发、保存、使用、传代等应及时认真详细地登记，以备查核。

　　第一步,分离纯化,观察纯种菌种的菌落形态,包括菌落大小,粘稠程度,颜色,湿度,边缘等等.第二步.菌株生理生化特性的鉴定,如发酵试验,耐盐,最适PH,温度,甲基红,吲哚,柠檬酸等试验第三步,16或18sDNA的序列鉴定第四步：根据上述结果,鉴定目的菌株

　　黑木耳组织分离以后经过5－10天的培养就可以看到有菌丝在接入培养皿中的组织块上开始萌发，我们需要通过以下几点进行观察，辨别、确认萌发出来的菌丝是否为我们的目标菌株－黑木耳菌丝。

　　一、看菌丝萌发位置　只有在平板内培养基上接入黑木耳组织块上生长、萌发出来的菌丝才有可能是我们的目标菌丝；

　　二、看菌丝颜色　正常的黑木耳菌丝洁白、浓密、粗壮。凡是有其它红、黄、绿、青、紫、黑、等杂色的菌比都是杂菌感染的迹象。

　　三、看菌丝长度　通过肉眼观察，黑木耳菌丝气生菌丝弱，普通PDA培养基表面在生长先期看不到超过0.5厘米长的气生菌丝。

　　三、看生长速度　黑木耳菌丝生长速度较慢，有些杂菌菌丝也呈现出菌丝洁白的表象，但是其生长速度快于木耳菌丝。直径9厘米的培养皿，在26度的条件下培养7天之内可以长满培养皿平面的基本可以断定为非黑木耳菌丝。

　　当我们做组织分离以后，如果技术手法纯熟会分离到没有杂菌相伴的纯黑木耳菌种。