吲哚乙酸标准曲线绘制 吲哚乙酸的测定

吲哚乙酸标准曲线是农业领域中常用的一种分析方法，通过绘制吲哚乙酸标准曲线可以快速准确地测定样品中吲哚乙酸的浓度。在农业生产中，吲哚乙酸广泛应用于植物生长调节剂、抗逆剂、促进根系生长等方面，因此对吲哚乙酸的测定具有重要意义。

吲哚乙酸标准曲线的绘制需要用到一定的仪器设备和试剂，具体步骤如下：

1.准备吲哚乙酸标准溶液，分别取10、20、30、40、50μg/mL的吲哚乙酸溶液，加入同等体积的甲醇，制成吲哚乙酸标准溶液。

2.取不同体积的吲哚乙酸标准溶液，加入同等体积的稀释液，制成不同浓度的吲哚乙酸标准曲线。

3.利用高效液相色谱仪等设备测定吲哚乙酸标准曲线各点的峰面积，并将峰面积与吲哚乙酸的浓度进行对应，绘制吲哚乙酸标准曲线。

吲哚乙酸标准曲线可以应用于农业生产的多个领域，如：

1.植物生长调节剂：吲哚乙酸是一种天然的植物生长调节剂，可以促进植物生长、增加产量。

2.抗逆剂：在植物生长过程中，吲哚乙酸可以提高植物的逆境抗性，增强植物对环境的适应能力。

3.促进根系生长：吲哚乙酸可以促进植物根系的生长，增加根系的表面积和吸收面积，提高植物的养分吸收能力。

与传统的测定方法相比，吲哚乙酸标准曲线具有以下优势：

1.准确性高：吲哚乙酸标准曲线可以通过高效液相色谱等设备测定各点的峰面积，并将峰面积与吲哚乙酸的浓度进行对应，准确测定吲哚乙酸的浓度。

2.操作简便：吲哚乙酸标准曲线的制备和测定过程简便，不需要特殊的技术和设备。

3.适用范围广：吲哚乙酸标准曲线可以应用于不同类型的植物和土壤样品的吲哚乙酸浓度测定。

吲哚乙酸是一种天然的植物生长调节剂，可以促进植物生长、增加产量。

吲哚乙酸的测定方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法等。

吲哚乙酸可以应用于植物生长调节剂、抗逆剂、促进根系生长等方面。

可以通过调节吲哚乙酸的浓度和施肥方式等方法来提高吲哚乙酸的利用效率。

吲哚乙酸的过量使用会导致植物生长异常、叶片变形、产量降低等问题。

相关拓展：

问：植物激素对附子多糖含量的影响

植物激素对附子多糖含量的影响

　　植物在生长的过程中受到内源激素(或外源激素)的调节作用，因此在植物的栽培过程中激素对其生长发育、生理生化、产量、品质、次生代谢产物等都可能会产生作用。

　　【摘要】目的研究植物激素对附子多糖含量的影响。方法在附子的苗期和子好渣根膨大期喷施不同的激素，采用蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量。结果不同的激素间差异明显，赤霉素(GA)、α-萘乙酸(NAA)对多糖含量的增加也有作用;6-苄氨基嘌呤(6-BA)和6-糠氨基嘌呤(KT)对多糖含量的增加也有作用;吲哚乙酸(IAA)有抑制影响。植物激素对附子多糖的含量有显著的影响。

　　【关键词】植物激素;附子;多糖

　　Abstract：ObjectiveTostudytheeffectsofplanthormonesonthedeterminationofpolysaccharideofAconitumcarmichaili.MethodsTheplanthormoneswerespray***ontheAconitumcarmichailiatthese***linggrowingperiodandtubersexpandingperiod.Theanthrone-sulfuricacidcolorimetrywasus***todeterminethepolysaccharide.ResultsTheresultsshow***thattherewassignificantdifferencebetweenthetreatments.TheeffectontheincrementofthecontentofpolysaccharidewiththetreatmentsofGAandNAAweresignificant.6-BAandKTalsoimprov***thecontentofpolysaccharide,butIAAhadinhibitoryeffectonit.ConclusionTheeffectsofplanthormonesonthedeterminationofpolysaccharideofAconitumcarmichailiaresingificant.

　　Keywords：Planthormones;Aconitumcarmichaili;Polysaccharide

　　1材料与仪器

　　1.1材料试验材料来自四川江油附子GAP基地的主要栽培种，由侯大斌教授鉴定。随机区组设计，重复3次，种植在西南科技大学校内实验田。试验田土壤特性：全氮含量为0.14%，速效氮含量为111.50mg/kg，速效磷含量为32.785mg/kg，速效钾含量为89.29mg/kg,有机质5.19mg/kg。底肥：农家肥kg/ha，油枯3000kg/ha，高效磷肥750kg/ha，按附子生产要求进行田间管理，每月除1次草。激素选用：GA(60mg/L)，6-BA(40mg/L)，NAA(30mg/L)，IAA(20mg/L)，KT(25mg/L)，对照(清水)，分别在苗期和子根膨大期喷施，06-27收获。

　　收获附子先用自来水清洗干净，在用蒸馏水漂洗两次，装入牛皮纸袋放入烘箱，在105℃下烘30min，再在60～70℃下烘干至恒重，粉碎过60目筛，4℃冰箱保存，备用。

　　1.2仪器设备、试剂旋转蒸发仪(Buchi公司)，BP211D电子分析天平(Storis公司)，T6普析通用新世纪紫外分光光度计(北京普析)，高速冷冻离心机(Backman公司)，中药切片机(长沙中南制药机械厂)、中草药粉碎机(天津泰斯特仪器有限公司)。

　　无水乙醇，丙酮，乙醚，氯仿，正丁醇，浓硫酸，蒽酮，葡萄糖等，以上试剂均为分析纯。

　　2方法

　　2.1附子多糖的提取[5，6]称取干燥的附子粉200g,加入适量80%乙醇,回流提取3h,抽滤，药渣挥尽乙醇后,沸水提取2次,1h/次,合并提取液,浓缩至200ml,加95%乙醇使醇含量达到80%,于4℃冰箱中醇沉***，离心(5000r/min，10min)，沉淀依次用无水乙醇、丙酮洗涤,得到粗多糖。用热水将粗多糖溶于水,用Sevage法(氯仿∶正丁醇=5∶1)除蛋白,重复3次(用考马斯亮蓝法测得无蛋白为止)。流水透析后,蒸发浓缩至200ml,加95%乙醇使醇含量达到80%,于4℃冰箱中醇沉***。离心,沉淀依次用无水乙醇、丙酮洗涤,真空干燥，称重计算得率。

　　2.2多糖含量的测定采用蒽酮-硫酸法[7]。以糖浓度(C，μg/L)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程A=0.0052X-0.0027,r=0.9992，葡萄糖在20～100μg/L与吸光度呈良好的线***。

　　2.3换算因子的测定精密称取附子多糖100mg,溶于1L容量瓶中,稀释至刻度,摇匀。精密吸取1ml于具塞试管中,按照蒽酮-硫酸法方法测定吸光度,根据回归方程计算多糖浓度中葡萄糖的浓度C,按下式计算出换算因子f。f=C·D/W。式中W为多糖质量(mg),C为葡萄糖浓度(μg/ml),D为稀释倍数。测得换算因子f=4.83(n=5,RSD=2.67%)。

　　2.4样品溶液的制备精密称取不同处理的附子样品1.0g(n=3)，加入150ml80%乙醇回流提取3h,抽滤，残渣挥尽乙醇后,用100ml水提取1h,2次,离心，定容至250ml的容量瓶中,为样品液。

　　2.5精确度实验精密称取附子粉5份，每份1g，按照“2.4”项下的方法同时制取5份样品溶液。精密移取各样品溶液各1ml分别置于具塞试管中，按照“2.2”项下的方法测定吸光度，计算附子多糖含量。测得RSD=1.83%(n=5),说明该分析方法精密度良好。

　　2.6稳定性实验按“2.4”项下样品溶液制备方法制备，吸取1ml试液于具塞试管中，按照“2.2”下的方法测定吸光度，每隔1h测定1次，连续6h，考察其稳定性。测得吸光度在6h内无明显变化，稳定性较好(RSD=1.70%)。

　　2.7数据处理数据用SAS软件进行方差分析和最小显著差数法(LSD)分析。

　　3结果

　　3.1精制多糖的得率干燥的附子粉200g,得到精制多糖10.82g,得率为5.41%(n=3)。

　　3.2回收率的测定精密称取5份附子样品液各1.0g,分别加入30mg左右的附子多糖,按照“2.4”项下样品溶液的制备和“2.2”项下的测定方法操作,测得吸光度,计算回收率(R)。回收率R=90.4%，RSD=1.58%(n=5)表1回收实验结果

　　激素对附子多糖的含量的影响见表3。区组间的方差分析可知，F=0.091F0.05,说明不同的激素间差异具有明显的差异性，多糖对不同激素的敏感性存在差异。GA，NAA对多糖含量的提高最为显著，平均含量分别是37.00，36.40mg/g，比对照增加了10.68%，8.88%，与其它激素和对照的差异达到极显著;两种细胞分裂素对多糖含量的影响也有显著的增加，但作用低于GA,NAA，含量分别为35.02mg/g和34.90mg/g，增加量分别是4.76%，4.40%和对照的差异也达到极显著。IAA对多糖含量有明显的抑制作用，多糖含量仅为32.13mg/g。几种激素的作用效果GA，NAA>KT，6-BA>CK>IAA。表3激素对附子多糖含量影响分析

　　字母表示处理间的差异显著水平，相同的字母表示两处理间没有差异，不同的字母表示两处理间差异显著，大写字母表示差异极显著(1%)，小写字母表示差异显著(5%)

　　4讨论

　　植物在生长的'过程中受到内源激素(或外源激素)的调节作用，因此在植物的栽培过程中激素对其生长发育、生理生化、产量、品质、次生代谢产物等都可能会产生作用。多糖作为附子有效成分之一，是评价附子药用价值的主要标准之一。目前对多糖含量的测定使用的方法还主要是经典的紫外比色法，通过验证，该方法具有较好精密度和稳定性，回收率也较高，是检测多糖含量的优良的方法之一。通过实验可以发现，激素对多糖的含量有调节作用。除IAA外其它几种激素对多糖含量都有明显的增加作用，说明IAA的作用具有不稳定性，这与前人研究的激素IAA的调节作用具有不稳定性比较相似[8]。IAA在植物生长的不同时期易受到吲哚乙酸氧化酶的破坏而失去作用，对植物的生长发育产生有影响，可能是抑制多糖含量的原因之一。由于激素对植物生长调节机理目前还不是很清楚，激素对多糖含量的影响还有待进一步研究。

　　【参考文献】

　　[1]国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部[S].北京:化学工业出版社,2024:28.

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　　[3]黄瑞松.中草药多糖含量测定方法概述[J].中国药师,2024,8(1):68.

　　[4]董兰凤,张英俊,刘京生,等.附子多糖与阿霉素长循环热敏脂质体的抗***作用及其机制探讨[J].细胞与分子免疫学杂志,2024,22(4):458.

　　[5]舒晓燕,刘慧,梁静,等.川附子粗多糖提取工艺的研究[J].中药材,2024,29(12):1349.

　　[6]杨帆,郝授国,徐恒瑰,等.附子多糖的含量测定[J].大连医科大学学报,2024,29(5):453.

　　[7]王秀奇,秦淑媛,高天慧.基础生物化学实验，第2版[M].北京:高等教育出版社，1999:103.

　　[8]张石城,刘祖祺.植物化学调控原理与技术[M].北京:中国农业科技出版社,1999:1.

问：为什么要测定植物根系活力？

因为根的生长情况和活力水平直接影响到植物个体的生长情况，营养状况和产量水碧拿逗平，所以要测定根系活力。

植物的根和地上部的生长具有相关性，一方面二者相互依赖，根负责从土壤中吸收水分，矿物质，有机质以及合成少量的有机物，细胞分裂素等等供地上部所用，而地上部则提***根生长所必需的糖类，维生素等。

根系发达，则地上部分生长良好。另一方面二者又相互制约，主要表现在对水分，营养等的争夺上，并从根冠比的变化上反映出来。

扩展资料：

据科学家研究，根冠中央细胞含有淀粉粒，这些淀粉粒可能起到“平衡石”的作用，在自然情况下，根垂直向下生长，“平衡石”沉积在根冠细胞的下部，水平放置后根悔卖冠中“平衡石”受重力影响改变了在细胞中的位置，向下沉积。

这种变化可能导致平衡石本身或通过它影响内质网而释放钙离子运向根的的近地一侧，此处钙离子量的增加又可能加强一种生长素(吲哚乙酸，即IAA)的向顶运输，进入根尖伸长区的近地一侧，使此处细胞生长速率明显下降，而远地部分的生长只受微小影响，从而使根向地弯曲生长。

这种方向性对植物来说是至关重要的，因为根只有向下生长，才能固定植物，才能充分吸收土壤中的水分和营养，而茎敏碧只有向上生长，才能使叶子得到光照，进行光合作用，制造自己需要的营养物质并放出氧气。

参考资料来源：百度百科-根系